114162-64-0 X-γλυκουρονίδιο CHA X-GlcA 5-βρώμιο-4-χλωρό-3-ινδοξυλοβ-βήτα-D-γλυκουρονικό οξύ

Το X-GlcA αναφέρεται στο X-Glucuronide, το οποίο είναι μια χημική ένωση που χρησιμοποιείται συνήθως στην έρευνα της μοριακής βιολογίας ως υπόστρωμα για τις αναφορές β-γλυκουρονιδάσης (GUS).όταν διαιρείται από β-γλυκουρονιδάση, παράγει μπλε ιζήματα ή αλλαγή χρώματος.

Στις αναλύσεις GUS reporter, το X-GlcA χρησιμοποιείται για την ανίχνευση της δραστηριότητας του ενζύμου GUS, το οποίο κωδικοποιείται από το γονίδιο GUS.Το γονίδιο GUS χρησιμοποιείται συχνά ως γονίδιο αναφοράς σε γενετικές μελέτες για την εκτίμηση της γονιδιακής έκφρασης και της δραστηριότητας του προωθητήΜε τη συγχώνευση του προωθητή του γονιδίου GUS με το γονίδιο ενδιαφέροντος, οι ερευνητές μπορούν έμμεσα να μετρήσουν τη δραστηριότητα του γονιδίου στόχου με την παρακολούθηση της δραστηριότητας του ενζύμου GUS.

Για την εκτέλεση της δοκιμής GUS, τα κύτταρα ή οι ιστούς που εκφράζουν την κατασκευή του GUS αναφέρουν συνήθως με διάλυμα που περιέχει X-GlcA.β-γλυκουρονιδάση που εκκρίνεται από τα κύτταρα ή εκφράζεται εντός των κυτταρικών διαχωρισμών X-GlcA, απελευθερώνοντας ένα μόριο που ονομάζεται 5-βρόμο-4-χλωρο-3-υδροξυινδόλη, το οποίο στη συνέχεια υφίσταται οξείδωση για να σχηματίσει ένα μπλε ρεύμα ή αλλαγή χρώματος.Η ένταση του μπλε χρώματος είναι ανάλογη με το επίπεδο δραστηριότητας του ενζύμου GUS, επιτρέποντας στους ερευνητές να αξιολογούν ποσοτικά ή ποιοτικά την έκφραση του γονιδίου-στόχου.

Το X-GlcA χρησιμοποιείται συχνά ως υπόστρωμα στις δοκιμές GUS λόγω της ιδιαιτερότητάς του για το ένζυμο GUS και της ευκολίας ανίχνευσης της αλλαγής του μπλε χρώματος.Έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως σε διάφορα βιολογικά συστήματα, συμπεριλαμβανομένων των φυτών, των ζώων και των βακτηρίων, για τη μελέτη των προτύπων έκφρασης γονιδίων, της δραστηριότητας των προωθητών και της γενετικής ρύθμισης.