εταιρικά νέα για Γιατί πρέπει να αποφεύγεται η επαναλαμβανόμενη κατάψυξη και απόψύξη του προετοιμασμένου διαλύματος tampon CAPS;

Σε πειραματικές μελέτες όπως η βιοχημεία και η μοριακή βιολογία,Το CAPS (3-cyclohexylamine-1-propanesulfonic acid) αναισθητικό διάλυμα χρησιμοποιείται συχνά σε πειράματα όπως η ηλεκτροφορέση πρωτεϊνών και ο προσδιορισμός της δραστηριότητας των ενζύμων λόγω των καλών ιδιοτήτων του αναισθητικούΩστόσο, στην πραγματική χρήση, οι ερευνητές συχνά λαμβάνουν υπενθυμίσεις για να "αποφεύγουν την επαναλαμβανόμενη κατάψυξη και απόψυξη".τις χημικές ιδιότητες του διαλύματος tampon CAPS, οι φυσικές αλλαγές κατά τη διάρκεια της κατάψυξης και της απόψυξης και οι πιθανές επιπτώσεις στα αποτελέσματα των πειραμάτων.

1Χαρακτηριστικά και μηχανισμός δράσης του διαλύματος αποθέματος ασφαλείας CAPS
Το CAPS είναι ένα κοινά χρησιμοποιούμενο βιολογικό απόθεμα ασφαλείας, η μοριακή του δομή περιέχει θειικό οξύ και ομάδες αμινών,που μπορεί να διατηρήσει τη σχετική σταθερότητα του pH του διαλύματος σε αλκαλικό περιβάλλον μέσω διάσπασης και πρωτονισμούΌταν προσθέτονται όξινες ή αλκαλικές ουσίες στο buffer διάλυμα CAPS, τα μόρια CAPS θα δεσμεύονται ή θα απελευθερώνουν πρωτόνια αναλόγως,και ρυθμίζουν τη συγκέντρωση ιόντων υδρογόνου στο διάλυμα μέσω της δικής τους ισορροπίας διάσπασης, ελέγχοντας έτσι την τιμή του pH σε ένα συγκεκριμένο εύρος.

2- Φυσικές επιδράσεις της επαναλαμβανόμενης κατάψυξης και απόψυξης στο διάλυμα tampon CAPS
Όταν το CAPS παγώσει, το νερό σταδιακά κρυσταλλώνει και σχηματίζει κρύσταλλους πάγου.αλλά μεγαλώνει κατά προτίμηση στην άκρη του διαλύματος και σε περιοχές όπου υπάρχουν ακαθαρσίεςΚαθώς οι κρύσταλλοι πάγου συνεχίζουν να επεκτείνονται, τα διαλυμένα στο διάλυμα θα συμπιεστούν στην περιοχή του μη κατεψυγμένου διαλύματος, με αποτέλεσμα την τοπική αύξηση της συγκέντρωσης του διαλυμένου.Κατά τη διάρκεια της διαδικασίας απόψυξης, οι κρύσταλλοι πάγου λιώνουν και ο όγκος του διαλύματος αποκαθίσταται, αλλά αυτή τη στιγμή η κατανομή των διαλυμένων στο εσωτερικό του διαλύματος δεν είναι πλέον ομοιόμορφη.Η επαναλαμβανόμενη κατάψυξη και η απόψυξη κάνουν αυτή τη διαδικασία να επαναλαμβάνεται συνεχώς, και ο όγκος του διαλύματος επεκτείνεται και συρρικνώνεται συχνά, καταστρέφοντας την ομοιομορφία του διαλύματος.

3Χημικές επιδράσεις της επαναλαμβανόμενης κατάψυξης και απόψυξης στο CAPS
(I) Μειωμένη απόδοση αποθήκευσης
Η επαναλαμβανόμενη κατάψυξη και η απόψυξη μπορεί να καταστρέψει τη δομή και τη σταθερότητα των μορίων CAPS.οι διακυμάνσεις της συγκέντρωσης διαλυμένων ουσιών και οι μηχανικές επιδράσεις των κρυστάλλων πάγου κατά τη διάρκεια της διαδικασίας κατάψυξης και απόψυξης μπορεί να προκαλέσουν αποδόμησηΟι αλλαγές αυτές θα αλλάξουν τα χαρακτηριστικά διάσπασης των μορίων CAPS, αποδυναμώνοντας ή ακόμη και χάνοντας την ικανότητα αποθήκευσης τους.Όταν μειώνεται η απόδοση αποθήκευσης, το αδιάβροχο διάλυμα CAPS δεν μπορεί να διατηρήσει αποτελεσματικά τη σταθερότητα του pH όταν αντιμετωπίζει εξωτερικές αλλαγές οξέος-βάσης, επηρεάζοντας έτσι τα πειραματικά αποτελέσματα που βασίζονται σε αυτό για την παροχή ενός σταθερού περιβάλλοντος.

ΙΙ) Χημική αντίδραση με άλλα συστατικά
Πολλές λύσεις αποθήκευσης CAPS θα προσθέσουν άλλα συστατικά όταν είναι έτοιμες να καλύψουν διαφορετικές πειραματικές ανάγκες.Επαναλαμβανόμενη κατάψυξη και απόψυξη μπορεί να προωθήσει χημικές αντιδράσεις μεταξύ αυτών των συστατικών ή μεταξύ των μορίων CAPSΟρισμένα στοιχεία ευαίσθητα στη θερμοκρασία μπορεί να αποσυντεθούν κατά τη διαδικασία κατάψυξης και απόψυξης, παράγοντας νέες προσμείξεις.που μπορεί να επηρεάσει τα βιολογικά μόρια στο πειραματικό σύστημα και να προκαλέσει αποκλίσεις στα πειραματικά αποτελέσματα.

4 Η επίδραση της επαναλαμβανόμενης κατάψυξης και απόψυξης στα αποτελέσματα των πειραμάτων
Για παράδειγμα, σε πειράματα έρευνας πρωτεϊνών, η χρήση διαλύματος CAPS που έχει παγώσει και αποψυχθεί επανειλημμένα μπορεί να οδηγήσει σε μεγάλα σφάλματα στα πειραματικά αποτελέσματα.Τα ασταθή περιβάλλοντα pH μπορούν να επηρεάσουν το φορτίο και τη δραστηριότητα των πρωτεϊνών, καθιστώντας ανακριβές τον διαχωρισμό, τον καθαρισμό και την ταυτοποίηση των πρωτεϊνών.Αλλά η κατεύθυνση του πειράματος μπορεί επίσης να παραπλανηθεί.